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微生物培養(yǎng)基常見的滅菌方法

發(fā)布時(shí)間:2022-02-15    瀏覽次數(shù):3570

在發(fā)酵過程中,培養(yǎng)基滅菌主要有以下幾個(gè)原因:如不滅菌,會(huì)使生物反應(yīng)的基質(zhì)或產(chǎn)物,因雜菌的消耗而損失,造成生產(chǎn)能力的下降;雜菌也會(huì)產(chǎn)生代謝產(chǎn)物,這就使產(chǎn)物的提取更加困難,造成得率降低,產(chǎn)品質(zhì)量下降;雜菌大量繁殖后,會(huì)改變反應(yīng)液的pH值,使反應(yīng)異常;有些雜菌會(huì)分解產(chǎn)物,使生產(chǎn)失敗;如果發(fā)生噬菌體污染,生產(chǎn)菌細(xì)胞將被裂解,使生產(chǎn)失敗。

常見的滅菌方法

1、化學(xué)物質(zhì)滅菌

原理:藥物與微生物細(xì)胞中的成分反應(yīng),使蛋白質(zhì)變性酶失活。使用范圍:器皿、雙手和實(shí)驗(yàn)室、無菌室的環(huán)境滅菌,不能用于培養(yǎng)基滅菌。

常用的滅菌劑:

甲醛 37%
戊二醛 2%
高錳酸鉀 0.1%~0.25%
苯酚 0.1%~0.15%
漂白粉 5%
過氧乙酸 0.02%~0.2%
酒精 75%
焦碳酸二乙酯 0.01%~0.1%
煤酚皂(來蘇爾) 1%~5%

化學(xué)物質(zhì)滅菌

2、輻射滅菌

輻射滅菌的原理是利用高能量的電磁輻射與菌體核酸的光化學(xué)反應(yīng)造成菌體死亡。常用的有紫外線、X射線和γ射線。用于室內(nèi)空氣及器皿表面滅菌。

輻射滅菌

3、干熱滅菌

滅菌原理是利用高溫對(duì)微生物有氧化、蛋白質(zhì)變性和電解質(zhì)濃縮作用而殺滅微生物。常用灼燒和電熱箱加熱,140-180℃ 1-2小時(shí)。適于對(duì)玻璃及金屬用具及沙土管滅菌。

干熱滅菌

4、濕熱滅菌

滅菌原理是直接用蒸汽滅菌,蒸汽在冷凝時(shí)能釋放出大量潛熱,蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞菌體蛋白和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活,微生物因代謝障礙而死亡。水煮常壓滅菌:100℃。或飽和蒸汽滅菌:一般121℃,30分鐘。適合培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備滅菌。

濕熱滅菌

5、過濾除菌

除菌原理是利用微生物不能透過濾膜除菌。方法是使用0.01~0.45 mm孔徑濾膜,用于壓縮空氣、酶溶液及其他不耐熱化合物溶液除菌。

過濾除菌

在工業(yè)生產(chǎn)中,對(duì)于培養(yǎng)基、管道、設(shè)備的滅菌,通常采用蒸汽加熱到一定的溫度,并保溫一段時(shí)間的滅菌方法,稱之為濕熱滅菌。濕熱滅菌的顯著優(yōu)點(diǎn)是:使用方便,無污染,而且其冷凝水可以直接冷凝在培養(yǎng)基中,也可以通過管道排出。

培養(yǎng)基滅菌大多數(shù)用濕熱滅菌。衡量熱滅菌的指標(biāo)很多,最常用的是“熱死時(shí)間”,即在限定的溫度下殺死原有微生物中一定比例所需的持續(xù)時(shí)間。影響熱滅菌的溫度和時(shí)間的因素很多,包括:微生物種類、性質(zhì)、濃度和培養(yǎng)基的性質(zhì)、濃度等。環(huán)凱干燥可供食品企業(yè)、藥品企業(yè)、大專院校、科研單位及各類實(shí)驗(yàn)室等,用作物品干燥、烘焙、熔臘、滅菌。

環(huán)凱干燥箱

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