應(yīng)對(duì)菌落蔓延，TTC的使用方法
發(fā)布時(shí)間：2023-04-21 瀏覽次數(shù)：1921
關(guān)于TTC的使用，從剛開(kāi)始的菌落蔓延，搜索解決辦法，了解TTC之后琢磨使用劑量，可以說(shuō)是花了一段不短的時(shí)間。包括對(duì)于TTC的使用，也可以說(shuō)“眾說(shuō)紛紜”，一開(kāi)始接觸的我真的也是不知道怎么去弄，是很頭疼的，而且遇到菌落蔓延的吧友還是挺多的。
好了，廢話說(shuō)到這，進(jìn)入正題：
首先，TTC有毒，不僅毒細(xì)菌也毒人，所以使用的時(shí)候要小心（其實(shí)用別的化學(xué)試劑也要小心，不好意思，又說(shuō)廢話了）。接著我個(gè)人是配置的0.5%的TTC溶液，你們可以根據(jù)個(gè)人的需要配置不同濃度。
配置方法：實(shí)驗(yàn)室用水（我們用的桶裝純凈水）200mL，TTC粉末1.00 g，水不用滅菌，我個(gè)人是稍微加熱（大概40℃水溫這樣就完全溶解了），也可以攪拌至完全溶解，然后倒入棕色瓶子，放無(wú)菌室靜置大概72小時(shí)（我個(gè)人是放置72小時(shí)，不確定24小時(shí)或者48小時(shí)行不行），此時(shí)配置出來(lái)的溶液加入空白培養(yǎng)基是養(yǎng)不成菌落的（我覺(jué)得這也說(shuō)明了這東西有毒）。沒(méi)必要先把水滅菌，也沒(méi)必要加入PDA培養(yǎng)基里一起121℃滅菌。
使用劑量：我一般是500mL PDA培養(yǎng)基 配 2.0mL 的 0.5%TTC 溶液，在無(wú)菌室里操作，在倒平板之前加，搖晃均勻就可以，本人親測(cè)，對(duì)解決菌落蔓延問(wèn)題非常有效，而且也不會(huì)有明顯的抑制細(xì)菌生長(zhǎng)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)不準(zhǔn)確的情況。
溫馨提醒：放置條件：避光低溫保存（我是室溫保存的，化驗(yàn)室經(jīng)常開(kāi)空調(diào)，大概在20-25℃左右，（下班了就25-30℃左右），目前放置了一個(gè)多月，沒(méi)有出現(xiàn)粉紅色。我查找資料的時(shí)候，說(shuō)是溶液呈粉紅色就要從新配置了。
小 結(jié)
目的 : 為便于區(qū)別樣品顆粒與菌落，可在每 100mL 瓊脂培養(yǎng)基中加入1 mL、 0.5% 的 TTC 溶液，如有細(xì)菌存在，培養(yǎng)后菌落呈紅色。
配制 : TTC 0.5g，蒸餾水 100mL，溶解。定性濾紙過(guò)濾，濾液置于棕色瓶中，4°C冰箱冷藏 。
滅菌 : 配好的0.5% TTC， 過(guò)濾除菌后置于棕色瓶中4°C冰箱冷藏 ; 或按預(yù)計(jì)使用量分裝入小管，115℃高壓滅菌 20min 、121度高溫滅菌15min，過(guò)后4°C冰箱冷藏。
使用 : 臨澆平板前，再按前述比例將TTC與培養(yǎng)基混合搖勻。
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