微生物限度培養(yǎng)基適用性常見問題解決
發(fā)布時間：2023-04-28 瀏覽次數(shù)：1430
1、在微生物實驗室進行平板類培養(yǎng)基適用性的時候，可能會遇到以下常見的情況，造成試驗失敗。
1）培養(yǎng)基平皿表面水珠凝聚，造成涂布培養(yǎng)后菌落蔓延無法計數(shù)。
2）培養(yǎng)后計數(shù)結(jié)果超標。
3）培養(yǎng)后沒有逐日觀察，造成菌落生長成團，無法計數(shù)或計數(shù)結(jié)果統(tǒng)計錯誤。
2、原因分析及解決措施
情況①：培養(yǎng)基平皿表面水珠凝聚的原因在于澆碟的時候，培養(yǎng)基溫度高，在平皿表面會形成水珠。
解決措施：培養(yǎng)基平皿表面水珠凝聚
◆ 培養(yǎng)基制備
培養(yǎng)基制備的一般流程：
① 上午10點開始用干粉培養(yǎng)基天平稱重，11點20開始滅菌，13:00開鍋，在滅菌鍋中冷卻至13:30。
② 將對照培養(yǎng)基置于50℃水浴鍋中待用。
知識點：滅菌鍋滅菌結(jié)束時，需要及時開鍋，避免培養(yǎng)基長時間在滅菌鍋中缺氧，造成培養(yǎng)基品質(zhì)下降，培養(yǎng)基適用性失敗且影響實驗結(jié)果。
◆ 培養(yǎng)基澆碟
50℃水浴鍋取出后，一般5分鐘之內(nèi)將培養(yǎng)基澆置空平皿中。平皿冷卻后，觀察培養(yǎng)基表面有無水珠，若無水珠則可直接進行涂布操作。多余的培養(yǎng)基可以放置在生物安全柜中或置密封袋（不是呼吸袋）里2-8℃保存。
若有水珠，若需要當天使用則打開平皿蓋，輕輕甩掉表面的水珠，在運行的生物安全柜中放置0.5-1h直到表面沒有水珠，然后進行涂布計數(shù)。
若不需要當天使用：
直接放置在生物安全柜中，蓋上平皿，生物安全柜關(guān)機，7天內(nèi)使用。
裝入自封袋中保存在2-8℃冰箱中，2周內(nèi)使用。使用前，提前一天取出，使平皿中水珠自動蒸發(fā)消失。
情況②：培養(yǎng)后計數(shù)結(jié)果超標的原因在于菌懸液制備不均勻。
每次制備的時候要渦旋3000轉(zhuǎn)30s，使用前再渦旋3000轉(zhuǎn)10s。特別是黑曲霉和白色念珠菌這種容易在底部沉底的菌，尤其需要注意。
情況③：培養(yǎng)后沒有逐日觀察，造成菌落生長成團。
無法計數(shù)或計數(shù)結(jié)果統(tǒng)計錯誤，可以參考下圖解決這個問題。
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