推薦閱讀
- 壓縮空氣微生物采樣器在無菌灌裝線吹瓶機高壓氣體微生物采樣的應用
- 環(huán)凱HandyPlate?測試片在方便面類食品檢測中的應用
- HandyPlate?快速菌落總數測試片在調味品行業(yè)的應用
- 浮游菌采樣器在醫(yī)院潔凈手術室的應用
- GB4789.15-2016霉菌和酵母計數檢驗及注意事項
- GB4789.11-2014 β型溶血性鏈球菌檢驗及其注意事項
- 更新 | GB4789.10-2016金黃色葡萄球菌檢驗及其注意事項
- 更新 | GB4789.8-2016 小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗及其注意事項
- 環(huán)凱生物酶底物法檢測系統(tǒng)(含質控樣)-酶底物法檢測水中總大腸菌群、糞（耐熱）大腸菌群、大腸埃希氏菌解決方案！
- 乳與乳制品中需氧芽孢及嗜熱需氧芽孢數的測定
平板培養(yǎng)基含有細菌生長所需要的營養(yǎng)成分，當取自不同來源的樣品接種于培養(yǎng)基上，在37℃溫度下培養(yǎng)，1~2天內每一菌體即能通過很多次細胞分裂而進行繁殖，形成一個可見的細胞群體的集落，稱為菌落。
每一種細菌所形成的菌落都有它自己的特點，例如菌落的大小，表面干燥或濕潤、隆起或扁平、粗糙或光滑，邊緣整齊或不整齊，菌落透明或半透明或不透明，顏色以及質地疏松或緊密等。因此，可通過平板培養(yǎng)來檢查環(huán)境中細菌的數量和類型。
微生物檢測材料
微生物
試劑、試劑盒
肉膏蛋白胨瓊脂
儀器、耗材
滅菌棉簽 接種環(huán) 試管架 酒精燈
實驗步驟
1.寫標簽
任何一個實驗，在動手操作前均需首先將器皿用記號筆做上記號，培養(yǎng)皿的記號一般寫在皿底上。如果寫在皿蓋上，同時觀察兩個以上培養(yǎng)皿的結果，打開皿蓋時，容易混淆。用記號筆寫上班級、姓名、日期，本次實驗還要寫上樣品來源(如實驗室空氣或無菌室空氣或頭發(fā)等)，字盡量小些，寫在皿底的一邊，不要寫在當中，以免影響觀察結果。
2.實驗室細菌檢查
(1)空氣將一個肉膏蛋白胨瓊脂平板放在當時做實驗的實驗室，移去皿蓋，使瓊脂培養(yǎng)基表面暴露在空氣中;將另一肉膏蛋白胨瓊脂平板放在無菌室或無人走動的其他實驗室，移去皿蓋。一小時后蓋上兩個皿蓋。
(2)實驗臺和門的旋鈕
①用記號筆在皿底外面中央畫一直線，再在此線中間處畫一垂直線。
②取棉簽左手拿含有棉簽的試管，在火焰旁用右手的手掌邊緣和小指、無名指夾持棉塞(或試管帽)，將其取出，將管口很快地通過煤氣燈(或酒精燈)的火焰，燒灼管口;輕輕地傾斜試管，用右手的拇指和食指將棉簽小心地取出。放回棉塞(或試管帽)，并將空試管放在試管架上。
③弄濕棉簽左手取滅菌水試管，如上法拔出棉塞(或試管帽)并燒灼管口，將棉簽插入水中，再提出水面，在管壁上擠壓一下以除去過多的水分，小心將棉簽取出，燒灼管口，放回棉塞(或試管帽)，并將滅菌水試管放在試管架上。
④取樣將濕棉簽在實驗臺面或門旋鈕上擦拭約2平方厘米的范圍。
⑤接種，A在火焰旁用左手拇指和食指或中指使平皿開啟成一縫。再將棉簽伸入，在瓊脂表面頂端接種(滾動一下)，立即閉合皿蓋。將原放棉簽的空試管拔出棉塞(或試管帽)，燒灼管口，插入用過的棉簽，將試管放回試管架。
⑥劃線另取接種環(huán)在火焰上滅菌，先將環(huán)端燒熱，然后將接種環(huán)提起垂直放在火焰上，以使火焰接觸金屬絲的范圍廣一些，待接種環(huán)燒紅，再將接種環(huán)斜放，沿環(huán)向上，燒至可能碰到培養(yǎng)皿的部分，再移向環(huán)端，如此很快地來回通過火焰數次。
左手拿起平板，同樣開啟一縫，將滅過菌并冷卻了的接種環(huán)(可在瓊脂表面邊緣空白處試溫度，若發(fā)出濺潑聲，表示太燙)，通過瓊脂頂端的接種區(qū)，向下劃線，直到平板的一半處。注意：接種環(huán)與瓊脂表面的角度要小，移動的壓力不能太大，否則會刺破瓊脂。
閉合皿蓋，左手將平板向左轉動至空白處，右手拿的接種環(huán)再在火焰上燒灼，使冷。接種環(huán)通過前面劃的線條再在瓊脂的另一半，從上向下來回劃線至1/2處。
燒灼接種環(huán)，轉動平板，劃最后1/4，立刻蓋上皿蓋，燒灼接種環(huán)，放回原處。整個劃線操作均要求無菌操作，即靠近火焰，而且動作要快。
3.人體細菌的檢查
(1)手指(洗手前與洗手后)
①分別在兩個瓊脂平板上標明洗手前與洗手后(當然，班級、姓名、日期各項在每次寫標簽時是必不可少的)。
②移去皿蓋，將未洗過的手指在瓊脂平板的表面，輕輕地來回劃線，蓋上皿蓋。
③用肥皂和刷子，用力刷手，在流水中沖洗干凈，干燥后，在另一瓊脂平板表面來回移動，蓋上皿蓋。
(2)頭發(fā)：在揭開皿蓋的瓊脂平板的上方，用手將頭發(fā)用力搖動數次，使細菌降落到瓊脂平板表面，然后蓋上皿蓋。
(3)咳嗽：將去蓋瓊脂平板放在離口約6~8 cm 處，對著瓊脂表面用力咳嗽，然后蓋上皿蓋。
(4)鼻腔
①按照實驗臺檢查法的步驟②和③，取出棉簽，并將其弄濕。
②用濕棉簽在鼻腔內滾動數次。
③按實驗臺檢查法的步驟④和⑤，接種與劃線，然后蓋上皿蓋。
4.將所有的瓊脂平板翻轉，使皿底在上，放37℃培養(yǎng)箱，培養(yǎng)1~2天。
5.結果分析
(1)菌落計數在劃線的平板上，如果菌落很多而重疊，則數平板最后1/4面積內的菌落數。不是劃線的平板，也一分為四，數1/4面積的菌落數。
(2)根據菌落大小、形狀、高度、干濕等特征觀察不同的菌落類型。但要注意，如果細菌數量太多，會使很多菌落生長在一起，或者限制了菌落生長而變得很小，因而外觀不典型，故觀察菌落的特點時，要選擇分離得很開的單個菌落。
菌落特征描寫方法
①大小大、中、小、針尖狀?？上葘⒄麄€平板上的菌落粗略觀察一下，再決定大、中、小的標準，或由教師指出一個大小范圍。
②顏色黃色、金黃色、灰色、乳白色、紅色、粉紅色等。
③干濕情況干燥、濕潤、粘稠。
④形態(tài)圓形、不規(guī)則等。
⑤高度扁平、隆起、凹下。
⑥透明程度透明、半透明、不透明。
⑦邊緣整齊、不整齊。
