細菌新型生化鑒定管使用說明
―― 071910 嗜肺軍團菌生化鑒定盒(7種×10次)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應的7種培養(yǎng)基各10瓶(表1)、配套試劑(茚三酮試劑、硝酸鹽還原試劑甲、乙液)各1瓶,無菌生理鹽水10瓶、0.5 McFarland的濁度管1支、一次性吸管10支、使用說明書一份。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)軍團菌生化鑒定盒的詳細使用方法
挑取待檢菌落進行革蘭氏染色鏡檢,軍團菌為革蘭氏陰性桿菌。將新鮮菌苔接種于普通肉湯中37℃培養(yǎng)18-24h或用0.85%無菌生理鹽水稀釋至0.5 McFa-rland(約108cfu/mL), 各吸取0.05-0.08mL(約1~2滴)的肉湯培養(yǎng)物或菌懸液加入每種微量西林瓶內(nèi)。(一般生化按此操作,有特殊要求的見表1)將接種后的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),結(jié)果觀察見下表1。注意:如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式,詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
產(chǎn)品名稱 | 結(jié)果判定 | 培養(yǎng)時間 | 使用說明 | |
陽性 | 陰性 | (小時) | ||
葡萄糖(軍團菌) | 黃色 | 紫色 | 18-24 | 接種培養(yǎng)后觀察顏色變化 |
乳糖(軍團菌) | 黃色 | 紫色 | 18-24 | 同上 |
麥芽糖(軍團菌) | 黃色 | 紫色 | 18-24 | 同上 |
硝酸鹽(還原)(軍團菌) | 深紅色 | 無色或者略帶淡粉紅色 | 18-24 | 接種培養(yǎng)后加硝酸鹽還原試劑甲、乙液各2滴,混勻,立即觀察結(jié)果。 |
尿素(軍團菌) | 桃紅色 | 淡橙紅色(不變色)或黃色 | 12-24 | 打開西林瓶膠塞后,向西林瓶中加入所配備的1.5mL/瓶的無菌水,充分溶解。再用接種針挑取新鮮菌苔直接接種于西林瓶內(nèi)。接種后,置于35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12-24h,觀察結(jié)果。 |
明膠(軍團菌) | 4℃液態(tài) | 4℃固態(tài) | 48-72 | 用接種針挑取新鮮菌苔穿刺接種,37℃培養(yǎng)后置4℃冰箱10分鐘后觀察結(jié)果。 |
馬尿酸(軍團菌) | 紫色 | 黃色 | 4 | 用接種環(huán)挑取3-4環(huán)菌苔接種后,35-37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)4h或者35-37℃水浴2h,加茚三酮試劑0.2mL,在35-37℃水浴鍋或者培養(yǎng)箱10min。如果仍不變色,可用未滴加試劑的培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)至24h再加茚三酮試劑,觀察結(jié)果。 |
四)嗜肺軍團菌的生化鑒定特征(只供參考)
類(葡萄糖、乳糖、麥芽糖)發(fā)酵陰性(—),硝酸鹽還原陰性(—),尿素酶陰性(—),明膠液化陽性(+),水解馬尿酸(+)。