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產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗注意事項

發(fā)布時間:2019-08-29    瀏覽次數(shù):5099

產(chǎn)氣莢膜梭菌為人類氣性壞疽的主要病原菌。1892年,美國病理學家W.H.韋爾奇等自一尸體分出本菌,因而又稱魏氏梭菌。菌體較大,大小為(0.9~1.3)×(3.0~9.0)微米,無鞭毛,有莢膜。芽孢橢圓形,位于次級端。厭氧不嚴格。菌落直徑2~5毫米,在血平板上會出現(xiàn)β溶血環(huán),并出現(xiàn)雙溶血帶。糖發(fā)酵能力強,產(chǎn)酸產(chǎn)氣。本菌的特征之一是在牛乳培養(yǎng)基中呈暴烈發(fā)酵現(xiàn)象。本菌廣泛存在于土壤、 人和動物的腸道以及動物和人類的糞便中,會散發(fā)臭味。

長期以來產(chǎn)氣莢膜梭菌一直僅被認為是一種創(chuàng)傷感染病原菌,直到1943年,才證實它可經(jīng)過消化道對人產(chǎn)生危害,為食物中毒病原菌。作為重要的病原菌,在食品及水的微生物檢驗標準中均有涉及,如GB 4789.23-2012、GB 8538-2016 ,在微生物實驗室產(chǎn)氣莢膜梭菌檢驗實驗過程中,應注意以下四點:

1、分離本菌采用TSC瓊脂(GB 4789.13-2012),添加樣品并傾注養(yǎng)基后,需注意在培養(yǎng)基凝固后在表面再傾注一層培養(yǎng)基,使得樣品完全被培養(yǎng)基覆蓋。若產(chǎn)氣莢膜梭菌暴露在外界,則可能導致其菌落不顯黑色。

產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124

產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124

2、進行暴烈牛乳發(fā)酵實驗時,含鐵牛乳培養(yǎng)基只煮沸溶解不滅菌的話,能有效提前暴烈發(fā)酵的時間。此外,接種菌液時,菌液濃度需較高,并且接種于培養(yǎng)基中下部,不能接種于培養(yǎng)基表面;因暴烈發(fā)酵時培養(yǎng)基會上升,因此培養(yǎng)及表面到試管口應留一定空隙,防止實驗過程中培養(yǎng)基溢出。

圖左為滅菌培養(yǎng)基,右圖為未滅菌培養(yǎng)基

圖左為滅菌培養(yǎng)基,右圖為未滅菌培養(yǎng)基

3、乳糖明膠在溫度較高之時呈現(xiàn)液態(tài),此時接種接種FTG培養(yǎng)物至乳糖明膠生化管當中即可。記得是在培養(yǎng)結束后將乳糖明膠放置4度1小時,再觀察培養(yǎng)基的液化情況,而不是在培養(yǎng)基結束后立刻觀察。

乳糖明膠生化管

陽性                                               陰性

4、緩沖動力硝酸鹽實驗,滴加硝酸鹽試劑甲、乙液以檢查亞硝酸鹽的存在。15 min 內(nèi)出現(xiàn)紅色者,表明硝酸鹽被還原為亞硝酸鹽;如果不出現(xiàn)顏色變化,則加少許鋅粉,放置10 min,出現(xiàn)紅色者,表明該菌株不能還原硝酸鹽。如果沒有出現(xiàn)顏色,說明原菌已經(jīng)將硝酸鹽還原至氮氣甚至銨鹽。

緩沖動力硝酸鹽實驗

產(chǎn)氣莢膜梭菌ATCC13124

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