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如何快速高效的配制PBS緩沖液

發(fā)布時(shí)間:2023-02-17    瀏覽次數(shù):3668

來(lái)源:實(shí)驗(yàn)小師兄公眾號(hào) 小師兄 原創(chuàng)文章

PBS是磷酸鹽緩沖液(PhosphateBuffer Saline),是生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室最常用的緩沖液之一。其主要成分包括:氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、磷酸氫二鈉(Na2HPO4)和磷酸二氫鉀(KH2PO4)。如何快速且高效的配制PBS緩沖液呢?首先我們需要配制10X的PBS母液,然后再對(duì)其母液進(jìn)行1:10稀釋即可獲得PBS緩沖液。

這樣做有兩個(gè)巨大的優(yōu)勢(shì):
   1,可以一勞永逸;
   2,減小誤差。下面為大家進(jìn)行介紹。

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準(zhǔn)備材料

NaCl  58.44 g/mol(終濃度136mM)
KCl   74.55 g/mol(終濃度2.6mM)
Na2HPO4 141.96 g/mol(終濃度10mM)
KH2PO4  136.09 g/mol(終濃度2mM)

燒杯兩個(gè)、微波爐或水浴鍋、量筒、磁力攪拌器及配套的轉(zhuǎn)子

開(kāi)始配制

1. 清洗干凈所需燒杯、轉(zhuǎn)子和量筒,向一個(gè)燒杯裝少量去離子水(約100ml)并放入一個(gè)轉(zhuǎn)子后放在稱(chēng)量天平旁備用;向另一個(gè)燒杯裝約800ml去離子水并在微波爐或者水浴鍋(65°以上均可)中加熱。

2. 按照如下表格稱(chēng)量試劑并倒入天平旁的燒杯中。

NaCl 8.0 g
KCl 0.2 g
Na2HPO4 1.42 g
KH2PO4 0.27 g
** 注意:由于實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)買(mǎi)的Na2HPO4常常帶有二水、七水或者十二水,與之對(duì)應(yīng)的重量分別為1.78g、2.68g、3.58g。

3. 向燒杯中加入預(yù)熱的去離子水,燒杯放置在磁力攪拌器上攪拌溶解。用量筒定容到1L,保存?zhèn)溆谩?/span>

4. 取100ml 10X的PBS母液,加入900ml去離子水即可獲得pH=7.4的PBS緩沖液(無(wú)需用pH計(jì)校準(zhǔn)PH值)。

總結(jié)

> 加入去離子水可以更快速的溶解鹽離子,而對(duì)PBS無(wú)影響。
> PBS可以高溫高壓滅菌后長(zhǎng)期保存,也可以過(guò)濾除菌后長(zhǎng)期保存。

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