食品廠微生物沉降涂抹作業(yè)指導(dǎo)書
發(fā)布時間：2023-07-14 瀏覽次數(shù)：957
01 參考標(biāo)準(zhǔn)：
GBT 16294-2010 醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法
GB 15979-2002 一次性使用衛(wèi)生用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
02 涂抹操作（菌落總數(shù)、大腸菌群）：
2.1 配制藥品：生理鹽水（試管中+棉簽）或直接采購無菌涂抹棒、PCA、VRBA
2.2 培養(yǎng)基滅菌：PCA------121℃，15分鐘；VRBA------無需滅菌，煮沸即可，生理鹽水------121℃，15分鐘
注：滅菌后的生理鹽水需冷卻徹底后才可以進(jìn)行涂抹操作
2.3 涂抹操作：
2.3.1 取待測物（人員手部、操作案板、工器具表面等）涂抹面積為5*5cm2；
2.3.2 涂抹后將與手部接觸的棉簽棒的部分折掉；
2.3.3 檢樣作出2~3個稀釋度：
1mL（原液）
→ 無菌平皿中（10-1），2板菌落，2板大腸=4板
→ 9mL滅菌生理鹽水中（10-2），2板菌落，2板大腸=4板
→ 于10-2試管中吸取1mL，加入9mL滅菌生理鹽水中（10-3），2板菌落，2板大腸=4板
注：菌落倒入配置后滅菌的PCA，15~20mL，大腸倒入配制后滅菌的VRBA，15~20mL
2.3.4 培養(yǎng)：待瓊脂凝固后放入培養(yǎng)箱中，平皿倒置（除霉菌PDA外，其余平皿均倒置培養(yǎng)），36±1℃，大腸培養(yǎng)24小時，菌落培養(yǎng)48小時。
2.3.5 查板計數(shù)：于N+1天，查大腸結(jié)果，N+2天，查菌落結(jié)果。
03 沉降菌（菌落總數(shù)、霉菌）
3.1 配制培養(yǎng)基：PCA、PDA；
3.2 倒板：按照計劃沉降點(diǎn)數(shù)，計算所需培養(yǎng)基及倒板的數(shù)量，PCA約20mL/板，PDA不得少于20mL/板（培養(yǎng)時間長，瓊脂少就干巴了）；
3.3 沉降：車間在30m2以上者，于東、西、南、北（距墻1m處）、中五點(diǎn)；小于30m2者，于一條對角線里、中、外三點(diǎn)，高度均在1.5m處采樣，打開平皿蓋，使平板在空氣中暴露5 min（操作時，周圍不得有人員走動，防止結(jié)果不準(zhǔn)）；
3.4 收板：將手部用75%酒精消毒后再收板，切忌觸碰到平板內(nèi)瓊脂；
3.5 培養(yǎng)：PCA,36±1℃,培養(yǎng)48小時；PDA,28℃,培養(yǎng)5天；
3.6 查板計數(shù)：于N+2天，查菌落結(jié)果，N+5天，查霉菌結(jié)果。
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