影響細(xì)胞生長(zhǎng)最常見(jiàn)的五類因素
發(fā)布時(shí)間：2023-07-21 瀏覽次數(shù)：2170
細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)受多種因素影響，在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，我們知道溫度不能過(guò)高也不能過(guò)低，有些細(xì)胞培養(yǎng)前還需要包被培養(yǎng)瓶，但實(shí)驗(yàn)過(guò)程中我們很容易忽略這些小因素，導(dǎo)致細(xì)胞負(fù)傷慘重。
這些小細(xì)節(jié)究竟如何影響的細(xì)胞狀態(tài)？在培養(yǎng)時(shí)我們又該如何避免？本期整理了影響細(xì)胞生長(zhǎng)最常見(jiàn)的五類因素，助您完美避坑！
01 細(xì)胞生長(zhǎng)附著物
貼壁細(xì)胞在正常情況下都會(huì)貼壁，但某些細(xì)胞本身貼壁不牢或貼壁性差，而包被附著物能夠促進(jìn)細(xì)胞的黏附，所以在培養(yǎng)一些特殊細(xì)胞時(shí)，需要對(duì)培養(yǎng)瓶/皿進(jìn)行包被后使用。常用的基質(zhì)有多聚賴氨酸（D型、L型）、明膠、膠原蛋白、細(xì)胞外基質(zhì)混合物，培養(yǎng)時(shí)可根據(jù)需要自行選擇。
小貼士：細(xì)胞貼壁差時(shí)可使用基質(zhì)包被培養(yǎng)瓶/皿。
02 細(xì)胞之間的接觸程度
正常細(xì)胞（二倍體）存在貼壁接觸抑制，長(zhǎng)滿后細(xì)胞生長(zhǎng)停止，而腫瘤細(xì)胞等非正常細(xì)胞，接觸抑制作用較弱，可生長(zhǎng)至較高的細(xì)胞密度，但某些細(xì)胞一旦長(zhǎng)過(guò)，其損傷難以逆轉(zhuǎn)，所以培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)不建議細(xì)胞密度太高。
小貼士：無(wú)論什么細(xì)胞，都不能長(zhǎng)滿再傳代，一般細(xì)胞匯合度達(dá)到70-80%即可傳代。
03 培養(yǎng)基PH值
大多數(shù)細(xì)胞系在PH7.4左右時(shí)生長(zhǎng)最好，而常規(guī)培養(yǎng)基的指示劑為酚紅，所以多數(shù)情況下，我們所見(jiàn)的培養(yǎng)基都呈紅色，但不同培養(yǎng)基的顏色會(huì)有差異，例如DMEM比1640顏色深一點(diǎn)。在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，也可以根據(jù)培養(yǎng)基的顏色判斷細(xì)胞狀態(tài)，如隨著細(xì)胞生長(zhǎng)，pH值會(huì)變成黃色。
小貼士：培養(yǎng)時(shí)時(shí)刻關(guān)注培養(yǎng)基顏色變化，發(fā)現(xiàn)異常及時(shí)處理。
04 氣相成分
大部分培養(yǎng)基適合于95%空氣 5%CO2，但有部分培養(yǎng)基例外，如L15培養(yǎng)基適合于100%空氣，CO2會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)液PH降低（培養(yǎng)液變黃），嚴(yán)重影響細(xì)胞生長(zhǎng)；若需要用L15培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，但沒(méi)有100%空氣培養(yǎng)箱時(shí)，可以擰緊瓶蓋或換培養(yǎng)基（效果可能更好）培養(yǎng)。適用于CO2環(huán)境的培養(yǎng)基需保持培養(yǎng)瓶透氣。
小貼士：培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)注意參照說(shuō)明書選擇培養(yǎng)基，并注意培養(yǎng)壞境。
05 培養(yǎng)溫度
對(duì)于大部分人源細(xì)胞和溫血?jiǎng)游锛?xì)胞系來(lái)講，比較適宜的培養(yǎng)溫度是37℃，因?yàn)檫@個(gè)溫度接近體溫，但為了安全可以再稍低一些，高于體溫的溫度要比低于體溫的溫度更易產(chǎn)生問(wèn)題。對(duì)于鳥類細(xì)胞，由于其體溫較高，所以培養(yǎng)溫度可以設(shè)置為38.5℃左右。
小貼士：培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)保持溫度穩(wěn)定，不要長(zhǎng)時(shí)間敞開(kāi)培養(yǎng)箱的門，并且不要將培養(yǎng)器皿大量重疊堆放在培養(yǎng)箱中，避免空氣不循環(huán)。
