實(shí)驗(yàn) bug 頻發(fā)，這個(gè)移液錯(cuò)誤你中招了嗎？
發(fā)布時(shí)間：2024-01-03 瀏覽次數(shù)：362
「正確移液」聽(tīng)上去像是每個(gè)實(shí)驗(yàn)人早已學(xué)會(huì)的基本操作，但實(shí)際上：
● 每次打出液體后，吸頭內(nèi)還殘留了部分液體；
● 檢測(cè)實(shí)驗(yàn)，加樣操作按標(biāo)準(zhǔn)來(lái)，但是卻總是污染；
● 處理樣本，提取 RNA/DNA 時(shí)，效率極低；
● 明明用的是全自動(dòng)的移液工作站，但是移液卻不夠精確。
而造成這一切的「真兇」往往是最讓人忽視的存在——移液吸頭。
你一定在想：只要能裝上的吸頭就是能用的吸頭吧，其實(shí)不然，低質(zhì)量吸頭不僅會(huì)讓殘留的污染影響到樣品，大量液體殘留，還會(huì)造成移液誤差，很多科研人的實(shí)驗(yàn)就敗在了這一步。如果移液器與吸頭匹配使用精確度不佳，會(huì)影響到移液系統(tǒng)的密封性以及精準(zhǔn)性。那么如何來(lái)挑選合適的耗材呢？大家在吸頭選擇上可以參考以下幾點(diǎn)：
一、按照實(shí)驗(yàn)需求，選擇吸頭類(lèi)型和功能
● 當(dāng)樣品體積未知或不一致時(shí)體積不均一，檢測(cè)動(dòng)物或環(huán)境液體樣本時(shí)（如血液，尿液，拭子，水質(zhì)等樣本），需要使用黑色導(dǎo)電吸頭。導(dǎo)電吸頭能檢測(cè)到其何時(shí)插入樣品，何時(shí)停止，防止過(guò)深插入樣品導(dǎo)致樣品溢出容器，污染整個(gè)工序；
● 當(dāng)樣本體積一致，且實(shí)驗(yàn)無(wú)特殊需求時(shí)，選擇標(biāo)準(zhǔn)吸頭即可；
● 避免交叉污染或保護(hù)，應(yīng)使用帶濾芯的吸頭；
● 防止實(shí)驗(yàn)中的 RNA/DNA 被降解引起結(jié)果錯(cuò)誤，應(yīng)該使用無(wú) RNA/DNA 酶的槍頭；
● 對(duì)于靈敏度要求高，或者易殘留的珍貴樣本時(shí)，應(yīng)該適應(yīng)低吸附吸頭，提升回收率。
二、吸頭準(zhǔn)確度判斷
良好的吸頭氣密性能夠保證工作站發(fā)出的指令被完美執(zhí)行，是吸頭選擇的重點(diǎn)指標(biāo)，可以通過(guò)吸取液體后懸停的方法，來(lái)判斷氣密性；
吸頭不能夠出現(xiàn)掛液現(xiàn)象，掛液會(huì)造成移液不準(zhǔn)確。可以通過(guò)試用的方式，進(jìn)行吸頭測(cè)試。
三、判斷吸頭的品質(zhì)
吸頭添加劑：吸頭在制作過(guò)程中會(huì)加入顯色劑、脫模劑等化學(xué)物質(zhì)，添加劑越多對(duì)移液造成的影響就越大，因此需要選擇添加劑少的吸頭；
生物污染：槍頭需要保證對(duì)存在的生物污染都已經(jīng)處理干凈，吸頭生產(chǎn)商應(yīng)該出具相應(yīng)的檢查報(bào)告，以確保對(duì)實(shí)驗(yàn)不存在影響；
在選擇導(dǎo)電吸頭時(shí)，需要特別注意其導(dǎo)電性，導(dǎo)電性良好的吸頭才能準(zhǔn)確檢測(cè)液面，避免移液失敗和樣本污染。
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