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一種在菌落總數(shù)測定中防止芽胞桿菌 菌落彌漫生長的方法

發(fā)布時間:2022-02-24    瀏覽次數(shù):2462

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隨著食品工業(yè)發(fā)展,食品種類越來越多,生產(chǎn)原料品種越來越廣,加工工藝也越來越復(fù)雜,但微生物的污染仍然無法避免,特別是糕點、面點等含高淀粉類食品受芽胞桿菌污染的機率大,加工過程中難以徹底滅菌,菌落計數(shù)時瓊脂平板上就會出現(xiàn)菌落彌漫生長的現(xiàn)象,導(dǎo)致菌落難以計數(shù),對菌落總數(shù)檢驗項目的準確性造成嚴重的干擾。

需氧細菌的新陳代謝作用能將 2,3,5 - 三苯基氯化四氮唑(TTC)還原為紅色的三苯甲臢(TPF),使得菌落呈紅色,故可以將 TTC 作為細菌生長的指示劑,同時 TTC 對細菌的生長有一定的抑制作用。因 此,可以利用 TTC 這一特性,尋求抑制菌落彌漫生長的有效方法,便于菌落計數(shù)。

鄭連寶,陳文祥,嵇林風(fēng)等取適宜稀釋度的枯草芽胞桿菌( Bacillus subtilis)、蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)、大腸埃希菌(Escherichia coli) 、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus),在平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基平板計數(shù)瓊脂(PCA)培養(yǎng)基中分別添加 0.01% 、0.05% 、0.08% 、0.1% 、0.2% 、 0.3% 、0.4% 、0.5% 、0.8% 、1.0% TTC 水溶液,同時以不添加 TTC 的計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基作為對照,觀察細菌的生長狀況。結(jié)果 TTC 濃度為 0.2% ~ 0.3% 時,能有效防止枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌在計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基上出現(xiàn)菌落彌漫生長,同時對大腸埃希菌和金黃色葡萄球菌的生長無顯著影響。

不同濃度 TTC 對細菌生長的影響

不同濃度 TTC 對細菌生長的影響

當(dāng)枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌液稀釋濃度分別為 10 - 5 和 10 -6時,菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍( 30 cfu/ml ~300 cfu/ml) 。

從表 1 可知,不同濃度 TTC 對細菌生長呈現(xiàn)不同的抑制效果。低濃度 TTC 對菌落總數(shù)計數(shù)無顯著影響。

不同濃度 TTC 對枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌落形態(tài)的影響

不同濃度 TTC 對枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌落形態(tài)的影響

由圖1和圖2所示,不同濃度 TTC 對枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌菌落形態(tài)也呈現(xiàn)出 3 種狀態(tài)。

TTC 濃度為 0.2% ~ 0.3% 時,菌落顏色愈紅,菌落形態(tài)與直徑大小接近對照組,但計數(shù)平板上菌落彌漫生長現(xiàn)象基本消失。

綜上所述,TTC 濃度為 0.2% ~ 0.3% 時,能有效防止枯草芽胞桿菌和蠟樣芽胞桿菌在計數(shù)瓊脂上出現(xiàn)菌落彌漫生長,同時對細菌的生長無顯著影響,而覆蓋法防止菌落彌漫生長的效果欠佳。因此,食品微生物檢驗中測定菌落總數(shù)時,遇到易受芽胞桿菌污染的食品,可在瓊脂中加入 0.2% ~ 0.3% 的 TTC 防止菌落出現(xiàn)彌漫現(xiàn)象而導(dǎo)致無法計數(shù)的情況發(fā)生。

內(nèi)容來源:鄭連寶,陳文祥,嵇林風(fēng),章小洪,丁琦,施華標.一種在菌落總數(shù)測定中防止芽胞桿菌菌落彌漫生長的方法[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,2019,29(22):2715-2717.

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